Aplicación
Electroforesis y transferencia
Buffers de carrera, tintes y reactivos de transferencia para SDS-PAGE, PAGE nativo y Western blotting.
Electroforesis de proteínas y ácidos nucleicos en buffer Tris-glicina o Tris-acetato, separación por tamaño en gel de poliacrilamida o agarosa, y visualización con tinción de Coomassie, plata o fluorescencia. Molekula suministra Tris, glicina, SDS, acrilamida, TEMED y APS de grado electroforesis.
¿Qué contiene este flujo de trabajo
- Buffers de electroforesis
- Tris-glicina (SDS-PAGE), Tris-tricina (péptidos de bajo peso molecular), TAE/TBE (ácidos nucleicos en agarosa).
- Monómeros para geles
- Acrylamida, bisacrilamida, TEMED, peroxosulfato amónico (APS).
- Detergentes y desnaturalizantes
- SDS, urea
- Tintes
- Azul de Coomassie R-250 / G-250, nitrato de plata.
- Transferencia
- Metanol-Tris-glicina, semiseco / tanque húmedo.
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Preguntas frecuentes
¿Qué porcentaje de gel de acrilamida debo utilizar?
Un 12% es un valor predeterminado adecuado para proteínas de 10–80 kDa; un 8% resuelve mejor proteínas más grandes; un 15% es ideal para péptidos pequeños. Utilice Tris-tricina para proteínas por debajo de 20 kDa.
¿Cómo se utiliza el APS en geles PAGE?
El APS (peroxisulfato de amonio) es el iniciador de radicales; el TEMED acelera la polimerización. La receta estándar es 0,05% APS + 0,05% TEMED en la mezcla del gel.
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