Anwendung
Elektrophorese und Blotting
Laufpuffer, Farbstoffe und Übertragungsreagenzien für SDS-PAGE, native PAGE und Western Blotting.
Elektrophorese von Proteinen und Nukleinsäuren in Tris-Glycin- oder Tris-Acetat-Puffer, Trennung nach Größe in Polyacrylamid- oder Agarosegel, Visualisierung mit Coomassie-, Silber- oder Fluoreszenzfarbstoff. Molekula liefert Elektrophorese-reine Tris, Glycin, SDS, Acrylamid, TEMED und APS.
Was enthält dieses Workflow
- Laufpuffer
- Tris-Glycin (SDS-PAGE), Tris-Tricine (niedrigmolekulare Peptide), TAE/TBE (Agarose-Nukleinsäuren)
- Gel-Monomere
- Acrylamid, Bis-Acrylamid, TEMED, Ammoniumperoxid (APS).
- Reinigungsmittel und Denaturierungsmittel
- SDS, Harnstoff
- Farbstoffe
- Koomassie Brillantblau R-250 / G-250, Silbernitrat
- Transferieren
- Methanol-Tris-Glycin, halbtrocken / nasstank
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Häufig gestellte Fragen
Welchen Acrylamidgehalt sollte ich verwenden?
12 % ist eine gute Ausgangskonzentration für Proteine im Bereich 10–80 kDa; 8 % eignet sich zur Auflösung größerer Proteine; 15 % für kleine Peptide. Tris-tricine zum Auflösen von Proteinen unter 20 kDa verwenden.
Wie wird APS in PAGE-Gelen verwendet?
APS (Ammoniumpersulfat) ist der Radikalinitiator; TEMED beschleunigt die Polymerisation. Standardrezeptur: 0,05 % APS + 0,05 % TEMED im Gelgemisch.
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