Électrophorèse en gel de polyacrylamide sous dénaturant
SDS-PAGE est une technique d'analyse protéique qui sépare les protéines selon leur masse moléculaire après leur dénaturation par le SDS (dodécylsulfate de sodium), permettant une estimation précise de la taille des protéines dans un échantillon.
Principe de séparation
L'électrophorèse en gel de polyacrylamide sous dénaturant (SDS-PAGE) repose sur la capacité du dodécylsulfate de sodium (SDS) à dénaturer les protéines et à leur conférer une charge négative uniforme proportionnelle à leur masse. Cette uniformisation de la charge permet de séparer les protéines uniquement selon leur poids moléculaire, sans influence de la structure native ou de la charge naturelle.
Applications en recherche et contrôle qualité
Cette méthode est largement utilisée dans les laboratoires de biotechnologie, de pharmacologie et de recherche fondamentale pour :
- Vérifier la pureté des protéines recombinantes,
- Estimer la taille des protéines après expression,
- Contrôler l'efficacité de la purification,
- Analyser les produits de dégradation ou les fragments protéiques.
Elle est également un préalable à des techniques comme la Western blot ou la spectrométrie de masse.
Related concepts
La technique est souvent combinée à des méthodes de visualisation comme le colorant de Coomassie, le rouge de silver ou des marqueurs fluorescents. Elle s'inscrit dans les protocoles standard de contrôle qualité (QC) et de validation de produits biologiques, conformément aux normes ISO, USP, EP et BP.
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