SDS-PAGE
SDS-PAGE es una técnica de electroforesis en gel que separa proteínas por su masa molecular utilizando dodecilsulfato de sodio (SDS) para denaturarlas y cargarlas negativamente.
¿Qué es SDS-PAGE?
SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis) es una técnica estándar en biología molecular y bioquímica para separar proteínas según su tamaño. El dodecilsulfato de sodio (SDS) desnaturaliza las proteínas, otorgándoles una carga negativa uniforme proporcional a su masa, lo que permite que la separación se base únicamente en el tamaño molecular.
¿Cómo funciona el proceso?
En SDS-PAGE, las proteínas se mezclan con un tampón de muestra que contiene SDS y un agente reductor como DTT o TCEP para romper enlaces disulfuro. Esta mezcla se carga en un gel de poliacrilamida, que actúa como una matriz de filtrado molecular. Al aplicar un campo eléctrico, las proteínas migran hacia el ánodo debido a su carga negativa. Las proteínas más pequeñas se mueven más rápido a través del gel, mientras que las más grandes se desplazan más lentamente, permitiendo una separación clara.
¿Para qué se utiliza?
Esta técnica es fundamental en la caracterización de proteínas, verificación de pureza, análisis de expresión génica, control de calidad en procesos de biotecnología y desarrollo de fármacos. Es ampliamente utilizada en laboratorios de investigación, producción de proteínas recombinantes y en la industria farmacéutica para validar la integridad de proteínas terapéuticas.
Conceptos relacionados
SDS-PAGE se combina frecuentemente con técnicas como Western blot, Coomassie staining, o Silver staining para detectar y cuantificar proteínas. También es clave en el análisis de muestras bajo condiciones de denaturación, esencial para estudios de estructura y función proteica.