الكروماتوغرافيا الكهربائية باستخدام بولي أكريلاميد مُحمّل بالصوديوم دوديسيلايت (SDS-PAGE)

ما هو SDS-PAGE؟

SDS-PAGE هو اختصار لـ "Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis"، وهو تقنية كهربائية شائعة في المختبرات الحيوية والكيميائية لفصل البروتينات حسب كتلتها الجزيئية. يُستخدم هلام بولي أكريلاميد كوسيلة فصل، بينما يعمل SDS (صوديوم دوديسيلايت) كعامل تحليل مُعدّل للشحنة، حيث يُفكك البروتينات ويعطيها شحنة سالبة موحدة، مما يُلغِي تأثير الشحنات الطبيعية ويسمح بالفصل بناءً على الحجم فقط.

كيف يعمل SDS-PAGE؟

عند تطبيق مجال كهربائي، تتحرك البروتينات المُحمّلة بـ SDS نحو القطب الموجب. لأن كل جزيء بروتين يحصل على شحنة سالبة مماثلة نسبيًا بالنسبة لكتلته، فإن سرعة الحركة تعتمد على حجم الجزيء: البروتينات الأصغر تتحرك أسرع من الأكبر. هذا يسمح بتحديد كتلة البروتينات من خلال مقارنتها بمعايير كتلة معروفة (Protein Ladder).

ما هي تطبيقات SDS-PAGE؟

تُستخدم هذه التقنية في تحليل نقاء البروتينات، وتحديد كتلة البروتينات، وفحص التغيرات الهيكلية، وتحليل التفاعل بين البروتينات، ودعم تطوير الأدوية واللقاحات. كما تُعد أساسًا لتقنيات متقدمة مثل Western Blot وMass Spectrometry.

مفاهيم ذات صلة

تُستخدم تقنيات مثل HPLC وGC-MS وELISA وNMR لتحليل البروتينات بشكل مكمل، بينما يُعتمد على SDS-PAGE كأداة أولية لفصل وتقدير كتلة البروتينات بدقة عالية.