qPCR
La qPCR (reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa) es una técnica molecular que permite cuantificar el ADN o ARN en tiempo real durante la amplificación, ofreciendo alta sensibilidad y precisión en el análisis de expresión génica, detección de patógenos y otras aplicaciones biotecnológicas.
¿Qué es la qPCR?
La qPCR (reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa, por sus siglas en inglés quantitative PCR) es una variante de la PCR convencional que permite medir la cantidad de ADN o ARN presente en una muestra durante el proceso de amplificación, en lugar de solo al final. Esta técnica se basa en la detección de fluorescencia en tiempo real, que se genera mediante sondas o colorantes intercalantes (como SYBR Green) que se unen al ADN amplificado. Cada ciclo de amplificación se acompaña de una lectura de fluorescencia, lo que permite rastrear la acumulación de producto en tiempo real.
¿Cómo funciona la qPCR?
Durante la qPCR, la fluorescencia aumenta proporcionalmente a la cantidad de producto amplificado. El punto en el que la señal de fluorescencia supera el umbral (llamado Ct, o cycle threshold) es inversamente proporcional a la cantidad inicial de material genético. Un Ct bajo indica una alta cantidad inicial de ADN/ARN, mientras que un Ct alto indica una cantidad baja. Esta relación permite cuantificar con precisión la expresión génica, la carga viral, la presencia de mutaciones o la contaminación microbiana en muestras biológicas.
¿Dónde se aplica la qPCR?
La qPCR es ampliamente utilizada en investigación biomédica, diagnóstico clínico, control de calidad en biotecnología, seguridad alimentaria y vigilancia epidemiológica. Es clave en estudios de expresión génica, detección de patógenos (como virus o bacterias), análisis de transgénicos y validación de terapias génicas. Su alta sensibilidad, especificidad y reproducibilidad la convierten en una herramienta esencial en laboratorios de alto rendimiento.
Conceptos relacionados
La qPCR se complementa con técnicas como la RT-qPCR (para ARN), la digital PCR (dPCR) y el análisis de datos mediante software especializado como Bio-Rad CFX Manager, Roche LightCycler o Thermo Fisher QuantStudio.