التفاعل المتسلسل بالترميز الكمي (qPCR)

ما هو التفاعل المتسلسل بالترميز الكمي (qPCR)؟

التفاعل المتسلسل بالترميز الكمي (qPCR) هو تقنية متطورة لقياس كمية الحمض النووي (DNA) أو الريبي (RNA) في عينة خلال عملية التضخيم، حيث يتم تتبع التفاعل في الوقت الفعلي باستخدام أصباغ أو تحفيزات فلورية. تُستخدم هذه التقنية في تحليل التعبير الجيني، وتشخيص الأمراض، وتحديد التغيرات الجينية، وفحص التلوث البيولوجي، وتحليل التفاعلات البيولوجية المعقدة.

كيف يعمل qPCR؟

يُستخدم qPCR مع مُضاعفات جينية (أوليغونوكلوتيدات) ومحفزات فلورية (مثل SYBR Green أو التحفيزات المحددة مثل التحفيزات المُستهدفة) للكشف عن التضخيم المتسلسل للحمض النووي. يتم قياس الإشارة الفلورية في كل دورة، مما يسمح بتحديد كمية المادة الوراثية الأصلية بدقة عالية. تُستخدم تقنيات مثل التحليل الكمي (Ct) لحساب كمية المادة في العينة.

ما الفوائد الرئيسية لاستخدام qPCR؟

تتميز qPCR بحساسية عالية، ودقة قياسية، وسرعة في النتائج، وقابلية التوسع في التطبيقات. تُستخدم في مجالات متعددة مثل الطب، الأبحاث الجينية، مراقبة جودة الأغذية، والبيئة. كما تُعدّ معيارًا ذهبيًا في العديد من التطبيقات المخبرية، خاصة في التحاليل السريرية والبيولوجية الجزيئية.

مفاهيم ذات صلة

تُستخدم qPCR غالبًا مع تقنيات أخرى مثل RT-qPCR (لقياس الريبي)، وتحليل البيانات باستخدام برامج مثل Bio-Rad CFX Manager، وتحتاج إلى معايير مرجعية مثل RNA مُستخلص من عينات مُعرفة (مثل RNA من خلايا HEK293) لضمان دقة النتائج.