Tampon à sel tamponné par Tris (TBS)
Le tampon à sel tamponné par Tris (TBS) est une solution saline tamponnée utilisée en biologie moléculaire et en immunologie pour maintenir un pH stable lors des expériences telles que l'immunoblotting, l'ELISA ou la purification d'antigènes.
Qu'est-ce que le tampon à sel tamponné par Tris (TBS) ?
Le tampon à sel tamponné par Tris (TBS) est une solution aqueuse contenant du chlorure de sodium (NaCl) et du Tris (tris(hydroxyméthyl)aminométhane), un tampon couramment utilisé pour réguler le pH dans les applications biotechnologiques. Il est généralement ajusté à un pH de 7,4 à 7,6, ce qui correspond au pH physiologique, ce qui le rend particulièrement adapté aux protéines et aux cellules vivantes.
Pourquoi utiliser le TBS plutôt que d'autres tampons ?
Le TBS est préféré à d'autres tampons comme le PBS (phosphate-buffered saline) dans certaines applications car il présente une meilleure stabilité et une faible interaction avec les protéines. Il est particulièrement efficace dans les protocoles d'immunodétection, où il permet de réduire les interactions non spécifiques tout en maintenant la structure des protéines. De plus, il est compatible avec de nombreuses techniques analytiques, notamment l'ELISA, l'immunoblotting et les essais de liaison antigène-anticorps.
Quelles sont les formulations courantes du TBS ?
Une formulation typique de TBS contient 137 mM de NaCl et 20 mM de Tris-HCl, ajustée à un pH de 7,4. Des variantes peuvent inclure des agents de blocage comme le BSA (protéine sérique bovine) ou le lait écrémé pour réduire les interactions non spécifiques. Le TBS peut également être modifié avec des agents chélatants comme l'EDTA pour inhiber les protéases ou des inhibiteurs de protéases pour préserver l'intégrité des protéines.
Concepts associés
Le TBS est souvent utilisé en combinaison avec d'autres solutions comme le TBS-T (TBS avec Tween-20) pour réduire la surface de contact non spécifique, ou avec des tampons spécifiques comme le HEPES pour des applications sensibles au pH.