Tris-puffernder Salzlösung (TBS)
Tris-puffernder Salzlösung (TBS) ist eine physiologisch ausgewogene Pufferlösung, die Tris(hydroxymethyl)amin (Tris) und Natriumchlorid enthält. Sie wird häufig in der Biochemie und Molekularbiologie für die Herstellung von Reagenzien, die Reinigung von Proteinen und in Immunassays verwendet.
Was ist Tris-puffernde Salzlösung (TBS)?
Tris-puffernde Salzlösung (TBS) ist eine standardisierte Pufferlösung, die auf Tris(hydroxymethyl)amin (Tris) und Natriumchlorid (NaCl) basiert. Sie wird durch Mischen von Tris und NaCl in Wasser hergestellt und hat typischerweise einen pH-Wert von etwa 7,4–7,6, was nahe der physiologischen pH-Werte liegt. Dies macht TBS besonders geeignet für biologische Anwendungen, bei denen die Stabilität von Proteinen und Enzymen gewährleistet sein muss.
Welche Anwendungen hat TBS in der Forschung?
TBS wird in zahlreichen Laborverfahren eingesetzt, darunter die Herstellung von Antikörpern, die Reinigung von Proteinen durch Affinitätschromatographie, die Durchführung von Western Blots und ELISA-Tests. Der Tris-Puffer stabilisiert Proteine und verhindert deren Denaturierung, während NaCl die Ionenstärke reguliert und die spezifische Bindung von Molekülen fördert. TBS kann auch mit Zusätzen wie Tween-20 (TBS-T) verwendet werden, um unspezifische Bindungen zu reduzieren.
Warum ist TBS gegenüber anderen Puffern bevorzugt?
Im Vergleich zu anderen Puffern wie Phosphatpuffer (PBS) hat TBS eine bessere Pufferkapazität bei physiologischem pH und ist weniger empfindlich gegenüber Temperaturänderungen. Zudem ist Tris leicht löslich und stabil in Lösung, was die Handhabung im Labor vereinfacht. Allerdings sollte beachtet werden, dass Tris bei hohen Temperaturen oder langen Lagerzeiten leicht abgebaut werden kann, was die Stabilität der Lösung beeinträchtigen kann.
Verwandte Konzepte
TBS ist eng verwandt mit PBS (Phosphatpuffernder Salzlösung), wird aber oft bevorzugt, wenn eine höhere Pufferkapazität erforderlich ist. Auch andere Puffer wie HEPES oder Tris-HCl werden in ähnlichen Anwendungen verwendet.