Resazurina
La resazurina es un colorante de fenoxazina azul y débilmente fluorescente que actúa como indicador redox. Las células metabólicamente activas la reducen de forma irreversible a resorufina, un compuesto rosa y muy fluorescente. Por ello se utiliza en ensayos de viabilidad y proliferación celular, en pruebas de citotoxicidad, en el control microbiológico y como indicador de anaerobiosis en medios de cultivo.
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Resazurina sal sodico
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¿Cómo funciona la resazurina como indicador?
La resazurina (C12H7NO4) es un compuesto azul con fluorescencia débil. En presencia de células vivas, las enzimas reductoras y cofactores como NADH y NADPH la reducen a resorufina, que es rosa y muy fluorescente. Una reducción adicional produce dihidrorresorufina, que es incolora. La señal es proporcional a la actividad metabólica de la muestra. Puede medirse por fluorescencia, con excitación aproximada de 530–570 nm y emisión aproximada de 585–590 nm, o por absorbancia. Al no ser un ensayo de punto final destructivo, a menudo permite realizar mediciones cinéticas y seguir trabajando con las mismas células.
¿En qué aplicaciones se utiliza?
- Viabilidad y citotoxicidad celular: es la base de reactivos comerciales como alamarBlue y se emplea en cribado de compuestos en placas de 96 y 384 pocillos.
- Microbiología: sirve para evaluar la sensibilidad antimicrobiana, por ejemplo en los ensayos de microdilución REMA, y para estimar la carga microbiana. Tradicionalmente se ha usado para valorar la calidad higiénica de la leche.
- Medios anaerobios: se añade como indicador del potencial redox. El medio permanece incoloro mientras está reducido y se vuelve rosa si entra oxígeno.
¿Qué conviene revisar al adquirirla?
Suele comercializarse como sal sódica, en polvo o en solución estéril. Para compras B2B conviene solicitar el CoA, con pureza, contenido de colorante y absorbancia, además de la SDS con la clasificación GHS. También hay que verificar el número CAS exacto de la forma suministrada, ya que la sal sódica y la forma libre tienen identificadores distintos. Se recomienda almacenarla protegida de la luz. Además, conviene validar el tiempo de incubación y la concentración para cada línea celular, porque una incubación prolongada puede sobrerreducir el reactivo a dihidrorresorufina y producir señales falsamente bajas.
Conceptos relacionados
Resorufina, ensayo MTT, ensayo XTT, ensayos de viabilidad celular basados en ATP, azul de metileno como indicador redox, citotoxicidad, concentración mínima inhibitoria (CMI) y medios de cultivo anaerobios.
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