Resazurin
Resazurin ist ein blauer, schwach fluoreszierender Phenoxazin-Farbstoff, der durch metabolisch aktive Zellen zum rosafarbenen, stark fluoreszierenden Resorufin reduziert wird. Aufgrund dieser Farb- und Fluoreszenzänderung wird er häufig als Redoxindikator in Zellviabilitäts- und Zytotoxizitätstests, in der mikrobiologischen Qualitätskontrolle sowie als Indikator für anaerobe Bedingungen in Nährmedien eingesetzt. Im Handel ist er meist als Natriumsalz erhältlich.
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Resazurin-Natriumsalz
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Wie funktioniert Resazurin als Indikator?
Resazurin (7-Hydroxy-3H-phenoxazin-3-on-10-oxid) ist ein Redoxfarbstoff. In lebenden, stoffwechselaktiven Zellen wird es durch zelluläre Reduktionsäquivalente wie NADH bzw. NADPH und Reduktasen irreversibel zu Resorufin reduziert. Dabei wechselt die Farbe von Blau nach Rosa, und die Fluoreszenz nimmt deutlich zu. Die Messung erfolgt photometrisch oder fluorimetrisch (Anregung typischerweise im Bereich von etwa 530–570 nm, Emission um etwa 585–590 nm). Eine weitere Reduktion führt zum farblosen, nicht fluoreszierenden Dihydroresorufin, was bei langen Inkubationszeiten zu beachten ist.
Wofür wird Resazurin im Labor eingesetzt?
- Zellviabilität und Zytotoxizität: Resazurin-basierte Assays (bekannt u. a. unter dem Handelsnamen alamarBlue) gelten als vergleichsweise schonend und erlauben oft Folgemessungen an denselben Zellen.
- Mikrobiologie: Bestimmung der minimalen Hemmkonzentration (MHK) sowie Wachstumsnachweis von Bakterien und Pilzen.
- Lebensmittelanalytik: Der klassische Resazurin-Test dient zur Abschätzung der mikrobiellen Belastung von Milch.
- Anaerobe Medien: Als Redoxindikator zeigt Resazurin an, ob ein Medium ausreichend reduziert ist.
Worauf ist bei Beschaffung und Qualität zu achten?
Resazurin wird meist als Natriumsalz angeboten. Für eine eindeutige Identifikation sollten die CAS-Nummer (Resazurin: 550-82-3; Natriumsalz: 62758-13-8), der Farbstoffgehalt sowie Reinheitsangaben im CoA geprüft werden. Lösungen sollten lichtgeschützt gelagert werden. Angaben zu Gefahrenkennzeichnung nach GHS und zur Handhabung sind dem jeweiligen SDS des Lieferanten zu entnehmen.
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Verwandte Begriffe
Verwandte Konzepte sind Resorufin als Reduktionsprodukt, MTT- und XTT-Tests als alternative Viabilitätsassays auf Tetrazoliumbasis, Redoxindikatoren wie Methylenblau, Fluoreszenzmessung im Mikrotiterplattenformat sowie die Bestimmung der minimalen Hemmkonzentration (MHK).
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