ELISA
ELISA (inmunoensayo de ligando enzimático) es una técnica inmunológica ampliamente utilizada para detectar y cuantificar proteínas, anticuerpos o antígenos en muestras biológicas con alta sensibilidad y especificidad.
¿Qué es ELISA?
ELISA, abreviatura de Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (inmunoensayo de ligando enzimático), es una técnica inmunológica que combina la especificidad de los anticuerpos con la sensibilidad de las enzimas para detectar y cuantificar moléculas biomoleculares en soluciones. Se basa en la unión específica de un antígeno a un anticuerpo fijado a una superficie sólida, seguida de una reacción enzimática que produce un colorante detectable, permitiendo la cuantificación mediante espectrofotometría.
¿Cómo funciona ELISA?
El proceso comienza con la inmovilización de un antígeno o anticuerpo en un microplato de poliestireno. Luego, se añade la muestra que contiene el analito de interés, seguida de un anticuerpo secundario marcado con una enzima (como peroxidasa de rábano o alcalina fosfatasa). Tras un lavado para eliminar los componentes no unidos, se añade un sustrato que la enzima convierte en un producto coloreado. La intensidad del color es proporcional a la cantidad de analito presente, lo que permite una cuantificación precisa.
¿Qué tipos de ELISA existen?
Existen varios tipos: directo, indirecto, competitivo y de captura. Cada uno se adapta a diferentes aplicaciones, como detección de anticuerpos en suero (indirecto), antígenos en fluidos corporales (captura), o cuantificación de proteínas en condiciones de alta especificidad (competitivo). Su versatilidad lo convierte en una herramienta esencial en investigación biomédica, diagnóstico clínico y control de calidad en biotecnología.
Conceptos relacionados
ELISA es fundamental en pruebas de diagnóstico de enfermedades infecciosas (como VIH, hepatitis), estudios de inmunología, desarrollo de fármacos y validación de proteínas recombinantes. Se complementa con técnicas como Western blot, PCR y HPLC para confirmar resultados.