Électrophorèse sur gel
Technique analytique utilisée pour séparer des molécules chargées, comme l'ADN, l'ARN ou les protéines, selon leur taille et leur charge dans un gel polymère. Elle est fondamentale en biologie moléculaire, en génie génétique et en recherche biomédicale.
Principe de séparation dans le gel
L'électrophorèse sur gel repose sur le déplacement de molécules chargées dans un champ électrique appliqué à travers un gel polymère, généralement de l'agarose pour l'ADN ou du polyacrylamide pour les protéines. Les molécules migrent vers l'électrode de charge opposée, leur vitesse étant influencée par leur taille, leur charge et la porosité du gel. Plus une molécule est petite, plus elle se déplace rapidement.
Applications en recherche et réglementation
Cette technique est essentielle pour vérifier la pureté d'échantillons, confirmer la taille des fragments d'ADN ou d'ARN, analyser l'expression protéique, ou détecter des mutations. En réglementation, elle est utilisée dans les contrôles qualité des produits biotechnologiques (ex. : vaccins, anticorps monoclonaux) selon les normes ISO, USP, EP, ou sous le cadre REACH et GHS. Elle est également intégrée dans les procédures de validation des méthodes analytiques (HPLC, PCR, ELISA).
Types courants de gels
- Gel d'agarose : adapté aux fragments d'ADN de grande taille (100 pb à 20 kb).
- Gel de polyacrylamide : utilisé pour les protéines ou les petits fragments d'ADN (jusqu'à 1000 pb).
- Gel SDS-PAGE : avec dénaturants (SDS) pour séparer les protéines selon leur masse moléculaire uniquement.
Related concepts
L'électrophorèse sur gel est souvent combinée à des techniques de détection comme la coloration au bromure d'éthidium (ADN), la révélation par Coomassie ou la méthode de Western blot pour l'analyse protéique.