UV-Vis
Técnica analítica que mide la absorción de radiación ultravioleta y visible por una sustancia, utilizada para cuantificar compuestos en solución y estudiar sus propiedades ópticas.
¿Qué es la espectroscopía UV-Vis?
La espectroscopía UV-Vis (ultravioleta-visible) es una técnica analítica ampliamente utilizada en química, biotecnología y farmacología para determinar la concentración de sustancias en solución. Se basa en la absorción de luz en el rango ultravioleta (UV, 200–400 nm) y visible (Vis, 400–700 nm) por moléculas que poseen electrones deslocalizados o niveles de energía electrónicos accesibles.
¿Cómo funciona el espectrofotómetro UV-Vis?
Un espectrofotómetro UV-Vis emite un haz de luz que atraviesa una muestra en un cubeta. La cantidad de luz absorbida se mide como función de la longitud de onda, generando un espectro de absorción. La ley de Beer-Lambert relaciona la absorbancia (A) con la concentración (c), el camino óptico (l) y el coeficiente de absorción molar (ε): A = εcl. Esta relación permite cuantificar sustancias en soluciones, como proteínas (a 280 nm), ácidos nucleicos (a 260 nm) o fármacos.
¿En qué aplicaciones se utiliza?
Se emplea en control de calidad de fármacos (USP, EP, BP), análisis de purificación de proteínas (por ejemplo, en cromatografía), estudios cinéticos de reacciones, y determinación de constantes de disociación. Es una técnica rápida, no destructiva y de bajo costo, ideal para procesos de validación y cumplimiento regulador (ISO, GHS, REACH).
Relacionado con
Espectroscopía, espectrofotometría, ley de Beer-Lambert, análisis cuantitativo, control de calidad, fármacos, proteínas, ácidos nucleicos.