البُنية الغربية
تقنية مخبرية تُستخدم للكشف عن بروتينات محددة في عينة حيوية باستخدام الأجسام المضادة الخاصة، وتُعد من الأدوات الأساسية في الأبحاث البيولوجية والطب الحيوي.
ما هي البُنية الغربية؟
البُنية الغربية (Western blot) هي تقنية تحليلية تُستخدم للكشف عن بروتينات معينة في عينة بيولوجية، مثل خلايا أو نسيج. تعتمد على فصل البروتينات حسب الكتلة الجزيئية باستخدام كهرباء في جل أكريلاميد (SDS-PAGE)، ثم نقلها إلى غشاء من نيتروسلولوز أو بولي فينيل ديفلورايد (PVDF)، حيث تُربط بالبروتينات المستهدفة باستخدام أجسام مضادة محددة. يتم الكشف عن البروتينات المُستهدفة باستخدام أجسام مضادة مُشعة أو مُلوّنة، مما يُظهر خطوطًا تمثل البروتينات المُراد تحليلها.
كيف تُستخدم البُنية الغربية في الأبحاث والطب؟
تُستخدم البُنية الغربية على نطاق واسع في الأبحاث البيولوجية لدراسة التعبير الجيني، وتحديد التغيرات في مستويات البروتينات في حالات مرضية مثل السرطان أو الأمراض العصبية. كما تُستخدم في تطوير الأدوية، وفحص فعالية العلاجات، وتحديد التغيرات في البروتينات الناتجة عن الطفرات الجينية. في المجال الطبي، تُستخدم كأداة تشخيصية مساعدة في بعض الأمراض، مثل مرض الزهايمر أو الأمراض المناعية الذاتية.
ما هي مزايا وعيوب البُنية الغربية؟
من مزاياها دقتها العالية في تحديد البروتينات المحددة، وقابلية التكرار، وسهولة التفسير. أما عيوبها فتشمل الوقت الطويل المطلوب، واحتياجها لكميات كبيرة من العينة، وصعوبة الكشف عن البروتينات ذات الكتلة الجزيئية المنخفضة أو العالية. كما أن النتائج تعتمد بشكل كبير على جودة الأجسام المضادة المستخدمة.
مفاهيم ذات صلة
تُستخدم البُنية الغربية غالبًا مع تقنيات أخرى مثل PCR وELISA وHPLC لتحليل كامل للبروتينات والحمض النووي، وتعتبر جزءًا من معايير الجودة في إنتاج الأدوية واللقاحات وفق معايير ISO وUSP وEP.