DTT (Dithiothreitol)

Was ist DTT (Dithiothreitol)?

Dithiothreitol (DTT) ist ein kleines, wasserlösliches Molekül mit zwei Thiolgruppen, das als starkes reduzierendes Agens in der Biochemie und Molekularbiologie verwendet wird. Es wird häufig in Pufferlösungen eingesetzt, um Disulfidbrücken in Proteinen zu reduzieren und so deren Struktur zu stabilisieren oder zu verändern. DTT ist besonders wirksam bei der Aufhebung kovalenter Bindungen zwischen Cysteinresten in Proteinen, was für die Aufrechterhaltung der funktionellen Aktivität von Enzymen und Antikörpern entscheidend ist.

Wie wird DTT in der Praxis eingesetzt?

In der Laborpraxis wird DTT in Pufferlösungen für die Proteinextraktion, Elektrophorese (z. B. SDS-PAGE) und Enzymreaktionen verwendet. Es verhindert die unerwünschte Oxidation von Thiolgruppen und sorgt so für eine stabile, reduzierte Form der Proteine. DTT ist gegenüber anderen Reduktionsmitteln wie TCEP stabiler bei physiologischem pH und wird daher häufig bevorzugt. Allerdings ist es empfindlich gegenüber Sauerstoff und muss daher frisch gelöst und unter Schutzgas (z. B. Stickstoff) gelagert werden.

Welche Alternativen zu DTT gibt es?

Alternativen zu DTT sind TCEP (Tris(2-carboxyethyl)phosphine), das bei niedrigerem pH stabil ist und weniger Geruch hat, sowie DTT-derivatisierte Formen wie TCEP-HCl. TCEP ist besonders nützlich in der Proteomik und bei der Analyse von Proteinstrukturen, da es auch in sauren Lösungen wirksam bleibt. DTT bleibt jedoch aufgrund seiner hohen Effizienz und Verfügbarkeit weiterhin weit verbreitet.

Verwandte Konzepte

DTT wird häufig in Verbindung mit anderen Reagenzien wie SDS, Tris, HEPES oder β-Mercaptoethanol verwendet. Es ist ein wichtiger Bestandteil in CoA (Zertifikat der Analyse), SDS-PAGE-Puffern und bei der Herstellung von Antikörpern und rekombinanten Proteinen.